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大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶检测试剂盒操作注意事项
更新时间:2022-08-16      阅读:807

大鼠 (Rat) 溴脱氧核苷尿嘧啶 (BrdU) ELISA 检测试剂盒操作注意事项

本试剂仅供研究使用     

试验原理:

BrdU试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BrdU浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BrdU和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BrdU的浓度呈比例关系。


大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶检测试剂盒操作注意事项

1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作


局限

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。


试剂盒性能

1. 灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。


结果判断与分析

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BrdU标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BrdU含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。


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